Гост р 31747-2012 статус

У нас вы можете скачать гост р 31747-2012 статус в fb2, txt, PDF, EPUB, doc, rtf, jar, djvu, lrf!

Контролируют стерильность среды во время использования. Используют среду в течение 4 ч после приготовления. Нейтральный красный переносят в фарфоровую ступку и постепенно растворяют в дистиллированной воде.

При нагревании растворяют в воде компоненты. При отсутствии мясного экстракта допускается использовать вместо мясного экстракта, пептона и дистиллированной воды мясопелтонный бульон, приготовленный по ГОСТ Феноловый красный переносят в фарфоровую ступку и постепенно растворяют в дистиллированной воде.

При этом количество дистиллированной воды, используемой для приготовления сред, уменьшают на количество натуральной желчи т. Приемлемой альтернативой посуде многоразового применения является одноразовая посуда, если она отвечает соответствующим требованиям. Важно, чтобы для испытания поступила представительная проба, не поврежденная и не измененная в ходе транспортировки или хранения.

При испытании высококислотных продуктов для предотвращения резкого снижения pH на 0. Допускается доводить pH до нейтрального значения с помощью стерильного раствора гидроокиси натрия в самом высококислотном продукте. При выявлении колиформных бактерий отмечают присутствие их в навеске х г или кем 3 продукта. При определении количества колиформных бактерий по методу НВЧ высевают не менее трех последовательных навесок продукта и или его разведений, отличающихся по количеству продукта в них в 10 раз.

Отбор навесок, приготовление исходного разведения и десятикратных разведений проводят по ГОСТ Готовят достаточное число разведений по ГОСТ Каждую навеску продукта в трехкраткой повторности высевают в среду двойной концентрации в пробирки размером 20 х мм.

Соотношение между количеством высеваемого продукта или его разведением и питательной средой 1: Осторожно перемешивают инокулум и среду. Допускается не проводить пересев на жидкую подтверждающую среду при явном газообразовании на жидких средах нормальной концентрации, считая при атом эти посевы положительными. Переносят стерильной пипеткой 1 см 3 жидкого продукта или соответствующего разведения в центр каждой чашки.

Аккуратно перемешивают инокулят со средой и оставляют смесь для застывания, для этого чашки Петри помещают на холодную горизонтальную поверхность. Параллельно для контроля стерильности агариэованной среды в стерильную чашку Петри наливают приблизительно 15 см 3 среды и инкубируют вместе с посевами.

Добавленная среда должна затвердеть, как описано в 9. При применении метода мембранных фильтров по ГОСТ фильтры переносят на поверх-ноешь агаризованной селективно-диагностической среды, избегая образования пузырьков воздуха между средой и фильтром. Поверхность фильтра с осевшими на ней бактериями должна быть обра-щвна вверх. При посеве методом мембранных фильтров на них подсчитывают количество колоний и в том случае, если их менее После инкубации по 9.

Посевы просматривают и отмечают рост типичных и атипичных колоний. На VRBL-arape типичные колонии колиформных бактерий пурпурно-красные диаметром не менее 0,5 мм. На агаре с бриллиантовым зеленым и феноловым красным типичные колонии колиформных бактерий зеленоватые, окруженные яркой желто-зеленой зоной. На среде Эндо типичные колонии колиформных бактерий от розового до красного цвета, часто с металлическим блеском.

Атипичные колонии отличаются оттипичных по цвету и размеру. К атипичным относят также все типичные колонии, выросшие в результате ферментации сахаров, за исключением лактозы, содержащихся в пищевых продуктах. Такие колонии не будут принадлежать к колиформным бактериям. Отбирают не менее чем по пять атипичных и типичных колоний. Каждую отобранную колонию пересевают в пробирки с одной из жидких питательных сред, приготовленной по 6.

Пересчет количества колиформных бактерий, определенного лосевом в или на агаризоеанные среды, на 1 г см 5 продукта проводят ло ГОСТ Результаты определения количества колиформных бактерий и выявления их в определенной навеске продукта записывают по ГОСТ При выявлении колиформных бактерий посевом в или на агариэованную среду подсчета количества колоний не проводят. После термо-статирования отмечают рост типичных и атипичных колоний. Атипичные колонии отбирают те.

Принадлежность к колиформным бактериям определяют по отношению к окраске по Гоаму. Приготовление мазков из культур, выросших на скошенной поверхности питательного агара, и окраску их по Гоаму. Колиформные бактерии являются грамотрицатепь-ными палочками. Допускается окраску по Гоаму заменять тестом Гоегорсвна. У грамположительных бактерий слизистых нитей не образуется.

Для определения оксидазы допускается использование дисков и растворов промышленного производства. Для контроля качества дисков и растворов используют музейные оксидаэопопожительные и оксидазоотрица-тельные культуры. Для определения ферментации лактозы испытуемую культуру высевают уколом в среду Гисса с лактозой. Сравнение структуры настоящего стандарта со структурами примененных в нем международных стандартов.

Коретникоаа Технический редактор в. Подписано а печать Доп тираж 38 экз Зак. Метод определения количества колиформных бактерий посевом в агаризованные селективно-диагностические среды предназначен для пищевых продуктов, содержащих в 1 г твердого продукта более или в 1 см жидкого продукта более 15 колониеобразующих единиц КОЕ колиформных бактерий. Метод определения количества колиформных бактерий посевом на агаризованные селективно-диагностические среды предназначен для пищевых продуктов, содержащих в 1 г твердого продукта более или в 1 см жидкого продукта более КОЕ колиформных бактерий.

Допускается использование хромогенных сред для предварительного выявления количества бактерий группы кишечных палочек колиформных бактерий в масложировой продукции. В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты: Общие требования и рекомендации по микробиологическим исследованиям ГОСТ Стекла предметные для микропрепаратов. Технические условия ГОСТ ГОСТ Посуда и оборудование лабораторные стеклянные.

Методы выявления и определения количества бактерий семейства Enterobacteriaceae Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному справочному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" за текущий год.

Если ссылочный стандарт заменен изменен , то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим измененным стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями: Определение присутствия или отсутствия колиформных бактерий в определенной массе или объеме продукта в соответствии с настоящим стандартом. При необходимости, подтверждают по биохимическим признакам принадлежности выделенных колоний к колиформным бактериям.

Сущность методов Методы выявления и определения НВЧ колиформных бактерий основаны на высеве определенного количества продукта и или разведений навески продукта в жидкую селективную среду с лактозой, инкубировании посевов, учете положительных пробирок, пересеве культуральной жидкости в жидкую селективную среду для учета газообразования или пересева, при необходимости, культуральной жидкости на поверхность агаризованной селективно-диагностической среды для подтверждения по биохимическим и культуральным признакам роста принадлежности выделенных колоний к колиформным бактериям.

Для определения наиболее вероятного числа пользуются таблицей ГОСТ Чашки с внесенным в них продуктом или его разведением заливают агаризованной питательной средой. Другую пару чашек используют для других количеств - исходной суспензии или десятикратных разведений продукта. Внесенный в чашки продукт или его разведения распределяют по поверхности агаризованной питательной среды стерильным шпателем.

Химические вещества, используемые для приготовления питательных сред и реактивов, должны быть аналитического качества. Двузамещенный фосфорнокислый калий , г. Однозамещенный фосфорнокислый калий , г. Разливают среду по 10 см в пробирки размером приблизительно 16х мм, содержащие пробирки Дархама поплавки , в случае использования среды нормальной концентрации, и в пробирки размером приблизительно 20х мм, не содержащие пробирки Дархама поплавки , в случае использования среды двойной концентрации.

Пробирки Дархама поплавки после стерилизации не должны содержать пузырьков воздуха. Разливают и стерилизуют среду по 6.

Раствор переливают в мерную колбу вместимостью см и доводят водой до метки. Раствор бромкрезолового пурпурового, см. Разливают среду по 6. Раствор кристаллического фиолетового, см. Тщательно размешивают компоненты или дегидратированную готовую среду в воде и оставляют на несколько минут. Нагревают до кипения, помешивая время от времени. Избегают перегрева среды, не применяя вторичного нагревания. Среду не стерилизуют в автоклаве. Контролируют стерильность среды во время использования.

Используют среду в течение 4 ч после приготовления. При отсутствии мясного экстракта допускается использовать вместо мясного экстракта, пептона и дистиллированной воды мясопептонный бульон, приготовленный по ГОСТ После стерилизации прибавляют раствор фенолового красного и раствор бриллиантового зеленого. При этом количество дистиллированной воды, используемой для приготовления сред, уменьшают на количество натуральной желчи то есть общий объем должен быть равен 1 дм.

Приемлемой альтернативой посуде многоразового применения является одноразовая посуда, если она отвечает соответствующим требованиям. Важно, чтобы для испытания поступила представительная проба, не поврежденная и не измененная в ходе транспортировки или хранения. Схема проведения испытания приведена в приложении А.

При испытании высококислотных продуктов для предотвращения резкого снижения рН на 0,5 и более питательных сред после внесения в них продукта или его разведения рН питательных сред доводят до допустимых значений с помощью стерильного раствора гидроокиси натрия, приготовленного по ГОСТ Количество добавляемого стерильного раствора гидроокиси натрия или величину, на которую необходимо увеличить рН при приготовлении питательных сред, устанавливают опытным путем.

Допускается доводить рН до нейтрального значения с помощью стерильного раствора гидроокиси натрия в самом высококислотном продукте. В качестве арбитражной среды используют бриллиантовый зеленый лактозный желчный бульон. При выявлении колиформных бактерий отмечают присутствие их в навеске г или см продукта.

Готовят достаточное число разведений по ГОСТ , гарантируя, что все пробирки, соответствующие конечному разведению, покажут отрицательный результат.

Каждую навеску продукта в трехкратной повторности высевают в среду двойной концентрации в пробирки размером 20х мм. Соотношение между количеством высеваемого продукта и питательной средой двойной концентрации 1: Каждую навеску продукта и или его разведения в трехкратной повторности высевают в пробирки размером 16х мм.

Соотношение между количеством высеваемого продукта или его разведением и питательной средой 1: Осторожно перемешивают инокулум и среду. Допускается не проводить пересев на жидкую подтверждающую среду при явном газообразовании на жидких средах нормальной концентрации, считая при этом эти посевы положительными. Переносят стерильной пипеткой 1 см жидкого продукта или соответствующего разведения в центр каждой чашки.

Аккуратно перемешивают инокулят со средой и оставляют смесь для застывания, для этого чашки Петри помещают на холодную горизонтальную поверхность.

В качестве арбитражной среды используют VRBL - агар. Параллельно для контроля стерильности агаризованной среды в стерильную чашку Петри наливают приблизительно 15 см среды и инкубируют вместе с посевами.

Добавленная среда должна затвердеть, как описано в 9. При применении метода мембранных фильтров по ГОСТ фильтры переносят на поверхность агаризованной селективно-диагностической среды, избегая образования пузырьков воздуха между средой и фильтром.

Поверхность фильтра с осевшими на ней бактериями должна быть обращена вверх. При посеве методом мембранных фильтров на них подсчитывают количество колоний и в том случае, если их менее Посевы просматривают и отмечают рост типичных и атипичных колоний.